Тестът за генотипизиране на фетален RHD е предназначен за откриване на безклетъчна фетална ДНК на RHD гена в кръвта на RhD-отрицателни бременни жени чрез метода на Real-Time PCR, за да се предвиди рискът от Rh-конфликт и хемолитична болест на плода и новороденото. По този начин се намалява ненужната анти-D профилактика и употреба на кръвни продукти, тъй като ~40% от RhD-отрицателните жени носят RhD-отрицателен плод.

Резус-факторът е протеин на повърхността на червените кръвни клетки (еритроцитите), който се синтезира от RhD гена и се наследява от родителите. Повечето хора (83%-87%) имат този протеин на повърхността на еритроцитите си и се наричат резус-положителни RhD(+), докато малка част (13%-17%) нямат резус-протеина и се наричат резус-отрицателни RhD(-) Съществува риск от Rh сенсибилизация към този протеин при RhD (-) жена, която е бременна с RhD(+) бебе. Когато се развие сенсибилизация, в тялото на бременна RhD (-) жена се образуват антитела, които могат да попаднат в кръвта на RhD(+) бебе през плацентата. Това причинява сериозни усложнения при плода. Смесване на майчините и феталните кръвни клетки понякога се случва по време на раждане в резултат на микротравми на плацентата и пъпната връв. Всички бременни жени с RhD(-) фактор преминават динамичен контрол на нивото на антитела към феталния D-антиген. Липсата на антитела не може да гарантира, че плодът също е RhD (-), тъй като производството на майчини антитела може да бъде инхибирано поради целостта на плацентата или потиснатия имунен отговор. Рискът от развитие на спонтанно Rh заболяване остава при определени обстоятелства. Понастоящем са известни няколко генетични причини за RhD-отрицателния фенотип на даден индивид. Тези причини варират в зависимост от етническия произход. При кавказката популация (европейски регион) от RhD-отрицателни индивиди генът RHD почти винаги липсва, но по-голямата част от RhD-отрицателните чернокожи африканци имат непокътнат, но нефункционален RHD ген, наречен RHD-псевдоген. Тестът, който се извършва в лаборатория Цибалаб за генотипизиране на фетален RHD е предназначен за откриване на фетален RHD ген, базиран на специфично откриване на два екзона на RHD гена (7-ми и 10-ти) в кръвта на RhD (-) майка. Откриването на два екзона обхваща голяма хетерогенна група от генни варианти и по този начин повишава надеждността на резултатите.

• RhD (-) бременни жени за определяне на необходимостта от Rh профилактика (резус профилактика се извършва, ако плодът е Rh-положителен)
• RhD (-) бременни жени, сенсибилизирани с анти-D антитела

Фрагменти от фетален генетичен материал, които се освобождават от плацентата, циркулират в кръвта на майката (извънклетъчна ДНК) по време на бременност.

С помощта на молекулярно-биологични методи (PCR в реално време) тези фрагменти се изследват за наличие на гена RHD гена. Ако генът RHD гена бъде открит в плода, той е резус-положителен. За изследването е необходима само кръвна проба от бременната жена. Тестът няма отрицателни ефекти върху здравето нито на плода, нито на майката. Количеството на феталната ДНК в майчината кръв се увеличава с увеличаване на гестационната възраст и зависи от състоянието на плацентата и характеристиките на протичането на бременността. Чувствителността на теста надвишава >99%, а специфичността е >98%.

Определянето на Rh фактора на плода се препоръчва от 19-та седмица от бременността. Тестът може да се проведе от 12-та гестационна седмица, но в случай на отрицателен RhD резултат е необходимо резултатът да се потвърди с повторно изследване от 17-та седмица от бременността. Изследването се провежда само въз основа на писмено информирано съгласие на бременната жена!

Положителен резултат:

Плодът е Rh положителен, така че се препоръчва анти-D профилактика.

Отрицателен резултат:

Ако плодът е Rh отрицателен, не се изисква анти-D профилактика. (Отрицателен резултат, получен преди 19-та седмица от бременността, не се счита за окончателен).

Материал за изследване:

Венозна кръв (К2EDTA) със сепарационен гел за отделяне на плазма (PPT вакутейнер). Независимо от определянето на Rh фактора на плода, препоръчва се Rh факторът на кръвта на новороденото да се определи с помощта на кръв от пъпна връв веднага след раждането на бебето

Ограничения

• Тестът е полезен само при едноплодни бременности. Не се провежда при близнаци.
• Ако резултатът от теста е неясен (1%), трябва да се приложи анти-D профилактика.
• Редки генетични варианти на Rh фактора могат да дадат фалшиво положителен резултат в 0,2-0,3% от случаите.
• Фалшиво отрицателен резултат може да се дължи на ниски концентрации на свободна фетална ДНК, разграждане на феталната ДНК или хемолиза на тестовата проба.